रसायन विज्ञान, जीव विज्ञान और चिकित्सा में, पिपेट एक विशिष्ट प्रयोगशाला उपकरण है जिसका उपयोग तरल की पूर्व निर्धारित मात्रा को वितरित करने के लिए किया जाता है, अक्सर मीडिया डिस्पेंसर के रूप में। आपके पिपेटिंग परिणामों की सफलता इस बात पर निर्भर करती है कि आप नाजुक अध्ययन करते समय पिपेट की मात्रा को कितनी सटीकता से पढ़ते हैं। सटीक, उच्च-गुणवत्ता वाले उपकरण का उपयोग करना यह सुनिश्चित करने का सबसे अच्छा तरीका है कि पिपेट की मात्रा को सही ढंग से पढ़ा जाए। चूंकि सटीकता और परिशुद्धता के लिए प्रयोगशाला की आवश्यकताएं लगातार बढ़ रही हैं, इसलिए आदर्श पिपेटिंग तकनीकों को समझना और उन्हें पूर्ण करना महत्वपूर्ण है।
पिपेट का उपयोग वैज्ञानिक अनुसंधान में किया जाता है और तरल की छोटी मात्रा को सही ढंग से मापने और स्थानांतरित करने के लिए उच्च परिशुद्धता की आवश्यकता होती है।
हालाँकि, उपकरण की खराबी या ऑपरेटर की गलती पिपेट माप त्रुटियों का कारण हो सकती है। वितरित मात्रा में कोई भी परिवर्तन qPCR जैसे प्रयोगों के परिणामों और पुनरुत्पादकता पर प्रभाव डाल सकता है।
पिपेट सटीकता को प्रभावित करने वाले कारक:
तापमान
सटीक पाइपिंग तापमान से बहुत प्रभावित होती है। डिलीवरी डिवाइस और लिक्विड के बीच तापमान का अंतर सबसे प्रभावशाली कारक है। थर्मल विस्तार के मामले-विशिष्ट प्रभाव लिक्विड सतह और पिस्टन के बीच हवा के अंतराल (मृत वायु मात्रा) में होते हैं। अन्य परिणामों के अलावा, यह टिप में खींचे गए तरल की मात्रा को कम या बढ़ा सकता है।
घनत्व
टिप में खींचे गए तरल की मात्रा घनत्व (द्रव्यमान/आयतन अनुपात) से प्रभावित होती है। पानी का उपयोग करके समान प्रक्रिया की तुलना में कम सघन तरल को चूसा जाता है। कम सघन तरल पदार्थों के लिए, परिणाम विपरीत होते हैं। यह लचीली मृत वायु मात्रा और पृथ्वी के गुरुत्वाकर्षण के कारण होता है। तरल घनत्व भी तापमान के साथ बदलता है। आम तौर पर, तरल का घनत्व भी तापमान के साथ बदलता है। 20 डिग्री / 68 डिग्री फ़ारेनहाइट पर, पानी का घनत्व आम तौर पर 0.998 किलोग्राम/डीएम3 होता है, इथेनॉल का घनत्व 0.79 किलोग्राम/डीएम3 होता है, और सल्फ्यूरिक एसिड (95-98% h2SO4) का घनत्व 1.84 किलोग्राम/डीएम3 होता है।
उच्च
सटीकता वायु दाब और भौगोलिक ऊंचाई से प्रभावित होती है। ऊंचाई जितनी अधिक होगी, वायु दाब उतना ही कम होगा और रूपांतरण कारक भी उतना ही कम होगा।
इसके अतिरिक्त, कुछ तरल पदार्थों के क्वथनांक काफी कम होकर कमरे के तापमान के बराबर हो जाते हैं, जिससे वाष्पीकरण हानि बहुत अधिक बढ़ जाती है।
अभिकर्मक वाष्पीकरण
अत्यधिक वाष्पशील अभिकर्मक वाष्प को अवशोषित करते हैं, जो टिप में प्रवेश करता है और आंतरिक दबाव बढ़ाता है। इसलिए, जब दबाव बढ़ने के कारण तरल बाहर निकलता है तो त्रुटियाँ होती हैं।
गलत पाइपिंग मोड चयनित
पाइपिंग के दौरान, ऑपरेटर अक्सर बैकवर्ड या फॉरवर्ड मोड का उपयोग करने के बारे में यादृच्छिक या व्यक्तिपरक निर्णय लेते हैं। हालाँकि, चिपचिपे नमूनों को ही रिवर्स मोड का उपयोग करना चाहिए। रिवर्स मोड में, प्लंजर को पूरी तरह से दबाया जाता है (पहले स्टॉप से पहले) ताकि सैंपल को चूसा जा सके, और फिर सैंपल को डिलीवर करने के लिए केवल आंशिक रूप से दबाया जाता है (पहले स्टॉप तक)। इसलिए, चिपचिपे तरल पदार्थों के साथ फॉरवर्ड मोड का उपयोग करने से अंडर-डिलीवरी होगी, जबकि जलीय घोल के साथ रिवर्स मोड का उपयोग करने से ओवर-डिलीवरी होगी।
टिल्ट पाइपिंग
सैंपल लॉस तब होता है जब पिपेट टिप एस्पिरेशन के दौरान कंटेनर की दीवार से संपर्क करती है। इसके अतिरिक्त, जब छोटी मात्रा में पिपेटिंग की जाती है, तो पिपेट को कोण पर वापस खींचने से सतह तनाव प्रभाव के कारण वॉल्यूम में बदलाव हो सकता है। कंटेनर से सीधे पिपेट को खींचने से त्रुटियां कम हो जाती हैं।